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    北京理工大学生物化学模拟题.docx

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    北京理工大学生物化学模拟题.docx

    生物化学模拟题及参考答案备注:以下两套生物化学模拟题的结构均为:名词解释(20个*3分/个)+单项选择题(10个*2分/个)+多项选择题(5个,4分/个,20分)+填空题(10空*2分/空)+问答题(2个*15分/个),总分150分,考试时间2h。题型结构参考了历年回忆版真题与硕士研究生入学初试基本相同,并且重点出题在于高频考点。第一套(1) 名词解释(20个*3分/个,60分)1. 蛋白质的一级结构:2.结构域:3.超二级结构:4.蛋白质的变性:5.蛋白质复性:6.蛋白质的沉淀作用:7.必需氨基酸:8.氨基酸的等电点:9.磷酸二酯键:10.碱基互补规律:11.核酸的变性:12.核酸的复性:13.退火:14.米氏常数:15.不可逆抑制:16.竞争性抑制:17.非竞争性抑制:18.ribozyme:19.hyperchromiceffect20.endonuclease:(2) 单选择题(10个,2分/个,20分)1、下列哪个化合物是糖单位间以-1,4糖苷键相连-。A、麦芽糖B、蔗糖C、乳糖D、纤维素2、下列何物是体内贮能的主要形式-。A、硬酯酸 B、胆固醇C、胆酸D、醛固酮E、脂酰甘油3、蛋白质的基本结构单位是下列那个-。A、多肽B、二肽C、L-氨基酸 D、L-氨基酸E、以上都不是4、酶与一般催化剂相比所具有的特点是-。A、能加速化学反应速度B、能缩短反应达到平衡所需的时间C、具有高度的专一性 D、反应前后质和量无改E、对正、逆反应都有催化作用5、通过翻译过程生成的产物是-。、RNA、RNA、RNAD、多肽链、DNA6、 物质脱下的氢经NADH呼吸链氧化为水时,每消耗1/2分子氧可生产ATP分子数量-。、C、3、E、57、 糖原分子中由一个葡萄糖经糖酵解氧化分解可净生成多少分子ATP?-A、1B、2C、3D、4E、58、下列哪个过程主要在线粒体进行-。A、脂肪酸合成B、胆固醇合成C、磷脂合成D、甘油分解 E、脂肪酸-氧化9、酮体生成的限速酶是-。A、HMG-CoA还原酶B、HMG-CoA裂解酶C、HMG-CoA合成酶D、磷解酶E、-羟丁酸脱氢酶10、有关G-蛋白的概念错误的是-。A、能结合GDP和GTP B、由、三亚基组成C、亚基聚合时具有活性 D、可被激素受体复合物激活E、有潜在的GTP活性(3) 多选题(5个,4分/个,20分)1、 基因诊断的特点是:-。A、 针对性强特异性高 B、检测灵敏度和精确性高B、 实用性强诊断范围广 D、针对性强特异性低E、实用性差诊断范围窄2、下列哪些是维系DNA双螺旋的主要因素-。A、盐键B、磷酸二酯键C、疏水键D、氢键E、碱基堆砌力3、核酸变性可观察到下列何现象-。A、粘度增加B、粘度降低C、紫外吸收值增加D、紫外吸收值降低E、磷酸二酯键断裂4、服用雷米封应适当补充哪种维生素-。A、维生素B2 B、维生素PPC、维生素B6D、维生素B12E、维生素C5、关于呼吸链的叙述下列何者正确?-。A、存在于线粒体B、参与呼吸链中氧化还原酶属不需氧脱氢酶C、NAD+是递氢体D、NAD+是递电子体E、细胞色素是递电子体(四)填空题(10空,2分/空,20分)1、 胞液中产生的NADH经-和-穿梭作用进入线粒体。2、 维生素根据其性质可以分为-和-两大类。3、 DNA分子中的嘌呤碱是-和-,嘧啶碱是-和-。4、 同工酶是指催化化学反应-而酶蛋白的分子结构和理化性质-的一组酶。5、 蛋白质是由-组成的生物大分子。(五)问答题(2个,15分/个,30分)1.试述cAMP-蛋白激酶途径中G蛋白的组成和主要机制?2.何谓酮体,酮体代谢有何生理意义?第一套参考答案(一)名词解释1.蛋白质的一级结构:指肽键中氨基酸的排列顺序。2.结构域:含有数百个氨基酸残基的多肽链折叠成两个或多个稳定的,相对独立的的功能性球状实体。3.超二级结构:在蛋白质中由若干相邻的二级结构元件组合在一起,彼此相互作用,形成种类不多,有规则,稳定的二级结构组合或二级结构串4.蛋白质的变性:蛋白质分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象5.蛋白质复性:是指当变性因素除去后,变性蛋白质又可以重新恢复到天然构象的现象6.蛋白质的沉淀作用:蛋白质在溶液中的稳定性是有条件的相对的,如果条件发生改变,破坏了蛋白质的稳定性,蛋白质就会从溶液中沉淀出。7.必需氨基酸:指人体(和其它哺乳动物)自身不能合成,机体又必需,需要从饮食中获得的氨基酸。8.氨基酸的等电点:指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等时的pH值,用符号pI表示。9.磷酸二酯键:单核苷酸中,核苷的戊糖与磷酸的羟基之间形成的磷酸酯键。10.碱基互补规律:在形成双螺旋结构的过程中,由于各种碱基的大小与结构的不同,使得碱基之间的互补配对只能在GC(或CG)和AT(或TA)之间进行,这种碱基配对的规律就称为碱基配对规律(互补规律)。11.核酸的变性:当呈双螺旋结构的DNA溶液缓慢加热时,其中的氢键便断开,双链DNA便脱解为单链,这叫做核酸的“溶解”或变性。12.核酸的复性:在适宜的温度下,分散开的两条DNA链可以完全重新结合成和原来一样的双股螺旋。这个DNA螺旋的重组过程称为“复性”。13.退火:当将双股链呈分散状态的DNA溶液缓慢冷却时,它们可以发生不同程度的重新结合而形成双链螺旋结构,这现象称为“退火”。14.米氏常数:酶反应速度达到最大反应速度的一半时底物的浓度。是酶的特征常数,只与酶的性质有关。15.不可逆抑制:这类抑制剂通常以比较牢固的共价键与酶蛋白中的基团结合而使酶失活,不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂而恢复酶活性。16.竞争性抑制:抑制剂与底物竞争酶的活性中心位点,阻碍了底物与酶的结合而抑制反应的发生。17.非竞争性抑制:酶可同时和底物及抑制剂结合,两者不存在竞争关系,但结合上抑制剂后不能产生产物。18.核酶(ribozyme)具催化活性的RNA或DNA。19.增色效应(hyperchromiceffect):当双螺旋DNA融解(解链)时,260nm处紫外吸收增加的现象。20.核酸内切酶(endonuclease):核糖核酸酶和脱氧核糖核酸酶中能够水解核酸分子内磷酸二酯键的酶。(二)单项选择题:15AECCD610CBECC(三)多项选择题:1、ABC2、DE3、BC4、BC5、ABCD(四)填空题1.-磷酸甘油苹果酸-天冬氨酸2、水溶性脂溶性3、AGCT4、相同不同5、氨基酸(五)问答题1.试述cAMP-蛋白激酶途径中G蛋白的组成和主要机制?G蛋白有三个亚基,分别是、亚基。三个亚基聚合时,亚基结合有GDP,这是无活性状态。激素与受体结合后促使亚基与GTP结合,并与、亚基分离,是G蛋白的活性状态,即G-GTP。由G-GTP激活腺苷酸环化酶。后者也存在于细胞质膜上,作用是催化ATP生成cAMP。CAMP产生一系列的生物效应。2.何谓酮体,酮体代谢有何生理意义?酮体是乙酰乙酸-羟丁酸丙酮的总称。酮体生成具有以下生理意义:(1)分子小,易溶于水,便于在血中运输。脂肪酰辅酶A进入线粒体内膜,需要载体肉毒碱转运,脂肪酸在血中转运需要与血浆清蛋白结合,而酮体通过线粒体内膜以及在血中转运均不需载体;(2)易通过血脑屏障及肌肉等的毛细血管壁,因而酮体易于利用,可以把酮体看作脂肪酸在肝脏加工生成的半成品;(3)节省葡萄糖供脑和红细胞利用。肝外组织利用酮体氧化供能减少了对葡萄糖的需求,以保证脑组织和红细胞的葡萄糖供应。在饥饿状态下也利用酮体供能,饥饿5-6周时,酮体供能可多达70%;(4)肌肉组织利用酮体时可抑制肌肉蛋白质的分解,减少蛋白质的消耗。第二套(一)名词解释(20个*3分/个,60分)1.酶原:2.酶的活性中心:3.生物氧化:4.呼吸链:5.氧化磷酸化:6.磷氧比:7.底物水平磷酸化:8.糖异生:9.乳酸循环:10.变构调节:11.糖酵解:12.糖的有氧氧化:13.磷酸戊糖途径:14.必需脂肪酸:15.脂肪酸的-氧化:16.氮平衡:17.联合脱氨作用:18.氨的同化:19.转氨作用:20.尿素循环:(二)单选择题(10个,2分/个,20分)1.鸟氨酸循环中,合成尿素的第二个氮原子来自-。A、氨基甲酰磷酸B、NH3C、天冬氨酸D、天冬酰胺E、谷氨酰胺2.下列哪步反应障碍可致苯丙酮酸尿症-。A、多巴黑色素B、苯丙氨酸酪氨酸C、苯丙氨酸苯丙酮酸D、色氨酸5羟色胺E、酪氨酸尿黑酸3.胆固醇合成限速酶是-。A、HMG-CoA合成酶B、HMG-CoA还原酶C、HMG-CoA裂解酶D、甲基戊烯激酶E、鲨烯环氧酶4.关于糖、脂肪、蛋白质互变错误是-。A、葡萄糖可转变为脂肪B、蛋白质可转变为糖C、脂肪中的甘油可转变为糖D、脂肪可转变为蛋白质E、葡萄糖可转变为非必需氨基酸的碳架部分5.竞争性抑制作用的强弱取决于-。A、抑制剂与酶的结合部位B、抑制剂与酶结合的牢固程度C、抑制剂与酶结构的相似程度D、酶的结合基团E、底物与抑制剂浓度的相对比例6.红细胞中还原型谷胱苷肽不足,易引起溶血是缺乏-。A、果糖激酶B、6磷酸葡萄糖脱氢酶C、葡萄糖激酶D、葡萄糖6磷酸酶E、己糖二磷酸酶7.三酰甘油的碘价愈高表示下列何情况-。A、其分子中所含脂肪酸的不饱和程度愈高B、其分子中所含脂肪酸的不饱和程度愈C、其分子中所含脂肪酸的碳链愈长D、其分子中所含脂肪酸的饱和程度愈高E、三酰甘油的分子量愈大8.真核基因调控中最重要的环节是-。A、基因重排B、基因转录C、DNA的甲基化与去甲基化D、mRNA的衰减E、翻译速度9.关于酶原激活方式正确是:-。A、分子内肽键一处或多处断裂构象改变,形成活性中心B、通过变构调节C、通过化学修饰D、分子内部次级键断裂所引起的构象改变E、酶蛋白与辅助因子结合10.呼吸链中氰化物抑制的部位是-。A、Cytaa3O2B、NADHO2C、CoQCytbD、CytCytC1E、CytcCytaa3(三)多选题(5个,4分/个,20分)1.糖异生途径的关键酶是-。A、丙酮酸羧化酶B、果糖二磷酸酶C、磷酸果糖激酶 D、葡萄糖6磷酸酶E、已糖激酶2.甘油代谢有哪几条途径-。A、生成乳酸B、生成CO2、H2O、能量C、转变为葡萄糖或糖原D、合成脂肪的原料E、合成脂肪酸的原料3.未结合胆红素的其他名称是-。A、直接胆红素B、间接胆红素C、游离胆红素D、肝胆红素E、血胆红素4.在分子克隆中,目的基因可来自-。A.基因组文库B、cDNA文库C、PCR扩增D、人工合成E、DNA结合蛋白5.关于DNA与RNA合成的说法哪项正确-。A、 在生物体内转录时只能以DNA有意义链为模板B、 均需要DNA为模板C、复制时两条DNA链可做模板D、 复制时需要引物参加转录时不需要引物参加E、复制与转录需要的酶不同(四)填空题(10空,2分/空,20分)1.葡萄糖分解代谢的途径主要有-、-和-。2.胆固醇在体内可转变成几种重要的类固醇即-、-、-。3.重组DNA分子是由-和-拼接而成。4.-酮酸主要有-、-和-3条代谢途径(五)问答题(2个,15分/个,30分)1.质粒载体需具备哪些特征?2. Warburg分子的作用和药物靶点?第一套参考答案(一)名词解释1.酶原:酶的无活性前体,通常在有限度的蛋白质水解作用后,转变为具有活性的酶。2.酶的活性中心:酶分子中直接与底物结合,并催化底物发生化学反应的部位,称为酶的活性中心。3.生物氧化:生物体内有机物质氧化而产生大量能量的过程称为生物氧化。4.呼吸链:有机物在生物体内氧化过程中所脱下的氢原子,经过一系列有严格排列顺序的传递体组成的传递体系进行传递,最终与氧结合生成水,这样的电子或氢原子的传递体系称为呼吸链或电子传递链。5.氧化磷酸化:在底物脱氢被氧化时,电子或氢原子在呼吸链上的传递过程中伴随ADP磷酸化生成ATP的作用,称为氧化磷酸化。6.磷氧比:电子经过呼吸链的传递作用最终与氧结合生成水,在此过程中所释放的能量用于ADP磷酸化生成ATP。经此过程消耗一个原子的氧所要消耗的无机磷酸的分子数(也是生成ATP的分子数)称为磷氧比值(PO)。7.底物水平磷酸化:在底物被氧化的过程中,底物分子内部能量重新分布产生高能磷酸键(或高能硫酯键),由此高能键提供能量使ADP(或GDP)磷酸化生成ATP(或GTP)的过程称为底物水平磷酸化。8.糖异生:非糖物质(如丙酮酸乳酸甘油生糖氨基酸等)转变为葡萄糖的过程。9.乳酸循环:酸循环是指肌肉缺氧时产生大量乳酸,大部分经血液运到肝脏,通过糖异生作用肝糖原或葡萄糖补充血糖,血糖可再被肌肉利用,这样形成的循环称乳酸循环。10.变构调节:变构调节是指某些调节物能与酶的调节部位结合使酶分子的构象发生改变,从而改变酶的活性,称酶的变构调节。11.糖酵解:糖酵解途径指糖原或葡萄糖分子分解至生成丙酮酸的阶段,是体内糖代谢最主要途径。12.糖的有氧氧化:糖的有氧氧化指葡萄糖或糖原在有氧条件下氧化成水和二氧化碳的过程。是糖氧化的主要方式。13.磷酸戊糖途径:磷酸戊糖途径指机体某些组织(如肝、脂肪组织等)以6-磷酸葡萄糖为起始物在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下形成6-磷酸葡萄糖酸进而代谢生成磷酸戊糖为中间代谢物的过程,又称为磷酸已糖旁路。14.必需脂肪酸:为人体生长所必需但有不能自身合成,必须从事物中摄取的脂肪酸。15.脂肪酸的-氧化:脂肪酸的-氧化作用是脂肪酸在一系列酶的作用下,在碳原子和碳原子之间断裂,碳原子氧化成羧基生成含2个碳原子的乙酰CoA和比原来少2个碳原子的脂肪酸。16.氮平衡:正常人摄入的氮与排出氮达到平衡时的状态,反应正常人的蛋白质代谢情况。17.联合脱氨作用:由转氨酶和L-谷氨酸脱氢酶联合作用脱去氨基的过程。18.氨的同化:由生物固氮和硝酸还原作用产生的氨,进入生物体后被转变为含氮有机化合物的过程。19.转氨作用:在转氨酶的作用下,把一种氨基酸上的氨基转移到-酮酸上,形成另一种氨基酸。20.尿素循环:尿素循环也称鸟氨酸循环,是将含氮化合物分解产生的氨转变成尿素的过程,有解除氨毒害的作用。(2) 单项选择题:15CBBDE610BABDA(3) 多项选择题:1、ABD2、ABCD3、ACE4、ABCD5、ABCDE(四)填空题1.糖酵解、糖有氧氧化、磷酸戊糖途径2.胆汁酸类固醇激素维生素D33.目的基因载体4.再合成氨基酸合成糖和酮体氧化供能(五)问答题1.质粒载体需具备哪些特征?特征:分子量相对较小,能在细菌内稳定存在,有较高的拷贝数。具有一个以上的遗传标志,便于对宿主细胞进行选择,如抗生素的抗药基因和营养代谢基因等。具有多克隆位点。便于外源基因的插入。2.Warburg分子的作用和药物靶点?肿瘤细胞可以通过一种异常的糖代谢行为来逃避正常的细胞凋亡程序,增强增殖和迁徙能力,这种异常的糖代谢行为叫作Warburg效应,是肿瘤得以发病的关键因素。Warburg效应是肿瘤细胞在有氧的情况下通过一系列分子机制来削弱有氧呼吸,进行高效糖酵解反应,进而获得大量三磷酸腺苷(ATP),以及制造适合肿瘤细胞生存的微环境,为肿瘤细胞制造了增殖优势。并且,Warburg效应通过局部低氧抑制T淋巴细胞的监控和杀伤力,制造肿瘤免疫逃逸。正常细胞体内,葡萄糖会维持一个平衡状态,在缺氧状态时,葡萄糖会转变为丙酮酸进而转变为乳酸,当氧含量正常时,丙酮酸会进入三羧酸循环。而肿瘤细胞即使在有氧情况下也不利用线粒体氧化磷酸化产能,转而利用有氧糖酵解,即Warburg效应。目前,人们已经发现Warburg效应存在于很多类型的肿瘤细胞。第三套(一)名词解释(20个*3分/个,60分)1.一碳单位:2.半保留复制:3.不对称转录:4冈崎片段:5领头链:6随后链:8.内含子:9.外显子:10.基因载体:11.操纵子:12.腺苷酸环化酶:13.共价修饰:14.钙调蛋白:15密码子:16反义RNA:17.核糖体:18多核糖体:19氨酰基部位:20肽酰基部位:(2) 单选择题(10个,2分/个,20分)(1)-酶的竞争性可逆抑制剂可以使:AVmax减小,Km减小BVmax增加,Km增加CVmax不变,Km增加DVmax不变,Km减小EVmax减小,Km增加(2)参加DNA复制的酶类包括:(1)DNA聚合酶;(2)解链酶;DNA聚合酶;(4)RNA聚合酶(引物酶);(5)DNA连接酶。其作用顺序是-。A(4)、(3)、(1)、(2)、(5)B(2)、(3)、(4)、(1)、(5)C(4)、(2)、(1)、(5)、(3)D(4)、(2)、(1)、(3)、(5)E(2)、(4)、(1)、(3)、(5)(3)在蛋白质生物合成中tRNA的作用是-。A将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上B把氨基酸带到mRNA指定的位置上C增加氨基酸的有效浓度D将mRNA连接到核糖体上(4)蛋白质的生物合成中肽链延伸的方向是-。AC端到N端B从N端到C端C定点双向进行DC端和N端同时进行(5)关于酶的性质哪一种说法不对?-。A.高效催化性 B.专一性 C.反应条件温和D.可调节控制 E.可使反应平衡向有利于产物方向移动(6)某一符合米氏方程的酶,当S=2Km时,其反应速度V等于-。A.VmaxB.2/3VmaxC.3/2VmaxD.2Vm(7)下面哪种酶在糖酵解和糖异生中都起作用-。A丙酮酸激酶B丙酮酸羧化酶C3-磷酸甘油醛脱氢酶D己糖激酶E果糖1,6-二磷酸酯酶(8)关于密码子的下列描述,其中错误的是-。A每个密码子由三个碱基组成B每一密码子代表一种氨基酸C每种氨基酸只有一个密码子D有些密码子不代表任何氨基酸(9)核糖体上A位点的作用是-。A接受新的氨基酰-tRNA到位B含有肽机转移酶活性,催化肽键的形成C可水解肽酰tRNA、释放多肽链D是合成多肽链的起始点(10)蛋白质的终止信号是由-。AtRNA识别B转肽酶识别C延长因子识别D以上都不能识别(三)多选题(5个,4分/个,20分)1.关于蛋白质中L-氨基酸之间形成的肽键,下列哪些叙述是正确的-。A.具有部分双键的性质B.比通常的C-N单键短C.通常有一个反式构型D.能自由旋转2.存在于蛋白质分子中的下列作用力,哪项不是次级键-。A.氢键B.肽键C.盐键D.疏水键E.二硫键3.血红蛋白的氧合曲线向右移动是由于-。A.O2分压降低B.CO2分压降低C.CO2分压增高D.N2分压增高E.pH值降低4.下列有关血红蛋白运输氧的叙述哪些是正确的-?A.四个血红素基各自独立地与氧结合,彼此之间并无联系B.以血红蛋白结合氧的百分数对氧分压作图,曲线呈S形C.氧与血红蛋白的结合能力比一氧化碳弱D.氧与血红蛋白的结合并不引起血红素中铁离子价数的变化5.关于蛋白质变性的叙述哪些是正确的-?A.蛋白质变性是由于特定的肽键断裂B.是由于非共价键破裂引起的C.用透析法除去尿素有时可以使变性蛋白质复性D.变性的蛋白质一定会沉淀(四)填空题(10空,2分/空,20分)1.参与DNA复制的酶有-、-、-、-。2.一分子硬脂酰CoA在线粒体氧化分解要经历-次,-氧化生成-分子乙酰CoA并经三羧酸循环彻底氧化分解净生成-分子ATP。3.葡萄糖分解代谢的途径主要有-,-和-。(五)问答题(2个,15分/个,30分)1.lac操纵子的基本结构是怎样的?它是如何通过阻遏物和CAP调节基因表达的?2.Crispr-cas9技术的原理与应用?第一套参考答案(一)名词解释1.一碳单位:仅含一个碳原子的基团如甲基(CH3-、亚甲基(CH2=)、次甲基(CH)、甲酰基(O=CH-)、亚氨甲基(HN=CH-)等,一碳单位可来源于甘氨酸、苏氨酸、丝氨酸、组氨酸等氨基酸,一碳单位的载体主要是四氢叶酸,功能是参与生物分子的修饰。2.半保留复制:双链DNA的复制方式,其中亲代链分离,每一子代DNA分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。3.不对称转录:转录通常只在DNA的任一条链上进行,这称为不对称转录。4冈崎片段:一组短的DNA片段,是在DNA复制的起始阶段产生的,随后又被连接酶连接形成较长的片段。5领头链:DNA的双股链是反向平行的,一条链是5/3/方向,另一条是3/5/方向,上述的起点处合成的领头链,沿着亲代DNA单链的3/5/方向(亦即新合成的DNA沿5/3/方向)不断延长。所以领头链是连续的。6随后链:已知的DNA聚合酶不能催化DNA链朝3/5/方向延长,在两条亲代链起点的3/端一侧的DNA链复制是不连续的,而分为多个片段,每段是朝5/3/方向进行,所以随后链是不连续的。7.重组修复:这个过程是先进行复制,再进行修复,复制时,子代DNA链损伤的对应部位出现缺口,这可通过分子重组从完整的母链上,将一段相应的多核苷酸片段移至子链的缺口处,然后再合成一段多核昔酸键来填补母链的缺口,这个过程称为重组修复。8.内含子:真核生物的mRNA前体中,除了贮存遗传序列外,还存在非编码序列,称为内含子。9.外显子:真核生物的mRNA前体中,编码序列称为外显子。10.基因载体:外源DNA片段(目的基因)要进入受体细胞,必须有一个适当的运载工具将带入细胞内,并载着外源DNA一起进行复制与表达,这种运载工具称为载体。11.操纵子:在转录水平上控制基因表达的协调单位,包括启动子(P)、操纵基因(O)和在功能上相关的几个结构基因。12.腺苷酸环化酶:催化ATP焦磷酸裂解产生环腺苷酸(cAMP)的酶。13.共价修饰:某种小分子基团可以共价结合到被修饰酶的特定氨基酸残基上,引起酶分子构象变化,从而调节代谢的方向和速度。14.钙调蛋白:一种依赖于钙的蛋白激酶,酶蛋白与钙结合引起酶分子构象变化,调解酶的活性。15密码子:存在于信使RNA中的三个相邻的核苷酸顺序,是蛋白质合成中某一特定氨基酸的密码单位。16反义RNA:具有互补序列的RNA。反义RNA可以通过互补序列与特定的mRNA相结合,结合位置包括mRNA结合核糖体的序列(SD序列)和起始密码子AUG,从而抑制mRNA的翻译。又称干扰mRNA的互补RNA。17.核糖体:核糖体是很多亚细胞核蛋白颗粒中的一个,由大约等量的RNA和蛋白质所组成,是细胞内蛋白质合成的场所。18多核糖体:在信使核糖核酸链上附着两个或更多的核糖体。19氨酰基部位:在蛋白质合成过程中进入的氨酰-tRNA结合在核蛋白体上的部位。20肽酰基部位:指在蛋白质合成过程中,当下一个氨酰基转移RNA接到核糖核蛋白体的氨基部位时,肽酰tRNA所在核蛋白体上的结合点。(二)单项选择题:1-5 CEBBE 6-10BCCAD(3) 多项选择题:1.ABC 2.BE 3.CE 4.BCD 5.BC(四)填空题1.DNA聚合酶、拓扑酶、解链酶、连接酶2. 89148 3.糖酵解、糖有氧氧化、磷酸戊糖途径(五)问答题1.lac操纵子的基本结构是怎样的?它是如何通过阻遏物和CAP调节基因表达的?乳糖操纵子结构如下图所示:结构基因部分由三个基因组成,它们是编码-半乳糖苷酶的基因Z,编码通透酶的基因Y,编码半乳糖苷乙酰化酶的基因a。位于结构基因前面的是调控区,由启动子P和操纵区O组成。位于调控区前面的是阻遏物基因I。此外,启动子上游还有一段短序列是分解代谢基因活化蛋白CAP的结合区。结构基因表达调控的方式如下:无乳糖时,I基因表达产生的阻遏物可与操纵区结合,从而挡住RNA聚合酶前移的通路,结构基因无法转录;当乳糖存在时,乳糖作为诱导物可以与阻遏物结合,并使得阻遏物发生变构而不能与操纵区结合,因此结构基因转录,产生三种消耗乳糖的酶;当乳糖和葡萄糖都存在时,细菌通常会先利用葡萄糖然后再利用乳糖。在利用葡萄糖时乳糖操纵子表达较差。当葡萄糖消耗完时,乳糖操纵子的表达增强。这种作用是通过CAP实现的。当cAMP与CAP结合后,后者构象发生变化,对DNA的亲和力增强。乳糖操纵子中CAP的结合位点紧接于启动基因上游区,cAMP-CAP复合物结合到DNA上的CAP位点后,则会促进RNA聚合酶结合到该启动基因上,进行转录。葡萄糖能显着降低细菌细胞中cAMP的含量,这样复合物cAMP-CAP减少,影响乳糖操纵子转录的启动。当葡萄糖消耗完,cAMP含量上升时,乳糖操纵子的转录启动。所以CAP是一种正调节蛋白,其作用需要cAMP参与。2.Crispr-cas9技术的原理与应用?CRISPR(Clustered regularly interspaced short palindromicrepeats)规律成簇间隔短回文重复;Cas9(CRISPRassociated nuclease)是CRISPR相关核酸酶,CCRISPR/Cas9是最新出现的一种由RNA指导的,利用Cas9核酸酶对靶向基因进行编辑的技术。CRISPR-Cas9,一种基因治疗法,这种方法能够通过DNA剪切技术治疗多种疾病。而CRISPR-Cas9基因编辑技术,则是对靶向基因进行特定DNA修饰的技术,这项技术也是目前用于基因编辑中前沿的方法。CRISPR/Cas9系统广泛存在于原核生物基因中,是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。在这些生物体中,来自噬菌体的外源遗传物质获得和整合入CRISPR位点。这些序列特异的片段被转录成短CRISPR的RNA(CRISPR-derivedRNA),crRNA通过碱基配对与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成双链RNA,然后tracrRNA/crRNA复合体指导Cas9蛋白切断双链DNA。一旦crRNA结合到Cas9,Cas9核酸酶的构象发生改变,产生一条能通道,让DNA更容易结合。Cas9/crRNA复合体能够识别PAM(5-NGG)位点导致DNA解旋,使crRNA找到PAM位点相邻的DNA互补链。当Cas9结合到PAM位点相邻的,与crRNA互补的DNA序列上,REC叶内部的桥螺旋和靶DNA形成RNA-DNA 异源双链结构。PAM位点的识别包括可使靶DNA双链断裂(DSB)的HNH和RuvC核断裂的激活,导致DNA降解。如果crRNA与靶DNA不互补,Cas9将会释放出来,寻找新的PAM位点。DNA中的线性靶基因组断裂后可以通过非同源末端接合(NHEJ)或者同源介导的修复(HDR)来进行修复,而非同源末端接合(NHEJ)会引起插入或者删除错误,从而达到定点敲除某种基因的目的。在利用CRISPR/Cas9系统进行基因组编辑的过程中,tracrRNA和crRNA可以融合成为1条RNA(sgRNA)表达同样可以起到靶向剪切的作用。因此现在我们用的CRISPR/Cas9工具只有Cas9核酸酶和gRNA两部分。应用此工具,我们可以非常方便快捷的进行任意基因的编辑改造,比如基因敲除,敲入,定点突变等等。

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