湖南师范大学硕士研究生入学考试复试题考试大纲复试笔试科目 考试科目：基因工程一、 考试形式与试卷结构1） 考试时间考试时间为 180 分钟。2） 答题方式答题方式为闭卷、笔试。3） 试卷内容结构基因工程 （90%）心脏发育的基因调控 （10%）4） 题型结构名词解释 10 个 （30%）填空题 20 个 （20%）简答题 5 个 （50%）二、 考试内容与考试要求（一） 基因工程部分第一章 基因工程概述 基因工程的基本概念，基因工程的基本流程，基因工程诞生的标志，基因工程有哪些主要应用？第二章 基因工程的工具酶和载体 1.基因工程的工具酶基因工程的工具酶有哪些？限制性内切核酸酶的特点与使用注意事项，DNA 聚合酶和 Klenow 大片段的作用，DNA 连接酶的作用， 碱性磷酸酶的作用及用途，末端脱氧核苷酸转移酶的用途和作用等。2. 基因工程的载体基因工程载体必须满足的基本条件，质粒载体的主要特征与基本结构，噬菌体载体有哪些类型，克隆载体有哪些类型？携带能力有多大？人工微小染色体的概念，标记基因的种类。什么是 互补？表达载体的概念与基本结构，T7 噬菌体启动子系统的组成、融合蛋白表达系统的概念与载体结构，真核表达系统的载体组成，真核表达载体高效表达的实现条件，各种载体的结构特征与各结构的作用等。第三章 目的基因的制备与鉴定 1.基因文库基因组文库的概念，基因组文库的构建方法， cDNA 文库的概念和构建流程，构建 cDNA 文库需要用到哪些工具酶，合成 cDNA 第二条链有哪些方法等。2.PCR 技术PCR 技术的基本原理，PCR 反应体系的主要成分，PCR 反应主要程序，提高 PCR 反应特异性的措施。逆转录 PCR、巢式 PCR、反向PCR、多重 PCR 及荧光定量 PCR 的概念和应用。3.蛋白质工程基因组数据库的概念，蛋白质工程的概念，PCR 介导定点突变的原理。4. 目的基因重组子的鉴定核酸分子杂交的概念，探针的类型与标记方法。Southern 杂交、Northern 杂交、Western 杂交及菌落（嗜菌斑）原位杂交的基本原理以及它们之间的相同点与不同点。 末端终止法 DNA 测序的基本原理，化学降解法测序的基本原理，DNA自动测序的基本原理等等。第四章 基因工程在基因功能研究中的应用 1.基因表达谱的研究胚胎原位杂交的概念，胚胎抗体染色的概念，基因芯片的概念与类型，基因芯片的流程与应用。2. 基因突变与基因敲除转座子诱变的原理与优点，基因敲除的概念与流程，条件基因敲除的原理与优点，RNA 干扰的概念与分子机制，RNA 干扰的优点与应用。基因过表达系统的组成，UAS-GAL4 系统的组成与优点。3.基因的相互作用研究凝胶迁移阻滞实验的原理与应用，酵母双杂交系统的原理与组成、酵母双杂交系统的应用，免疫共沉淀的原理等。第五章 转基因植物 1.转基因植物的制备植物转基因的受体系统的类型，外源基因导入植物的方法， Ti质粒的结构特点， Ti 质粒介导植物基因转移的过程。植物转基因载体的报告基因，提高外源基因在植物体内表达水平的策略。2.转基因植物的现状抗虫转基因植物的概念，抗除草剂转基因作物的概念。植物生物反应器的概念。转基因生物的安全性和主要影响因素等。第六章 转基因动物 转基因动物的概念，显微注射法制备转基因动物的主要过程。逆转录病毒法制备转基因动物的主要过程。胚胎干细胞的概念。胚胎干细胞制备转基因动物的流程。体细胞核移植法及其制备转基因动物的主要流程。动物器官生物反应器的概念。转基因动物的应用。转基因动物在医药科学研究中的应用。转基因小鼠的鉴定方法。 第七章 基因治疗 基因治疗的概念，基因治疗的基本策略，基因治疗的载体类型。体外基因治疗与体内基因治疗的比较。单基因遗传病的基因治疗策略，肿瘤基因治疗的策略，耐药基因治疗的概念，自杀基因治疗的概念等。艾滋病基因治疗的策略等。第八章 基因工程药物 基因工程药物、基因工程抗体、基因工程疫苗的概念，基因工程药物的优点，基因工程药物的发展概况等。 （二） 心脏发育的基因调控部分心脏发育有哪些基因控制？如何鉴定某个基因与心脏疾病相关？心脏发育与基因控制的关系是什么？心脏发育基因调控研究的进展如何？三、 参考书目1. 袁婺洲主编，基因工程。北京，化学工业出版。2010 年。2. 吴秀山，袁婺洲等。心脏发育概论。科学出版社。2006 年